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一步完成gDNA去除与反转录,远离污染和降解风险!

——Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR

多数情况下,提取的RNA中可能会混有基因组DNA(gDNA),如果不清除其中混有的gDNA,反转录后获得的cDNA产物中也会混有gDNA。若在设计qPCR引物时未跨越内含子,cDNA和gDNA在qPCR反应中可能会被同时扩增,从而导致cDNA的定量结果会存在偏差,甚至失去意义。

通常对提取的RNA样本进行gDNA去除,能够让我们获得更准确的实验结果。一般gDNA去除会在反转录前进行,在一定条件下完成gDNA消除后再加入反转录相关试剂进行反转录,这种方法操作比较复杂,频繁开盖和加样在一定程度上会增加样品污染和降解的风险。

112net永利|中国有限公司潜心研发的 Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR(Cat# 11142),可在同一管中进行反转录和gDNA去除两个反应,操作更加方便,实验更有保障!

 

产品特点

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操作简单:反转录与基因组去除一步完成

高效去除:可去除200 ng基因组,效果卓越

合成出色:不同GC含量基因反转录效率表现出色

高灵敏度:样品检出率高,最高灵敏度可达1pg

高稳定性:试剂盒4°C可存放14天;cDNA产物37°C可保存14天,反复冻融50次

适用性广:适用于人、小鼠、拟南芥、大肠杆菌等样本

 产品性能展示


1.gDNA去除能力表现优异

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图2.在扩增体系中加入200 ng 293T gDNA,使用Yeasen、A*品牌、B*品牌相关组分进行gDNA去除,对照组不进行gDNA去除。反转录得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,Yeasen产品的gDNA去除能力表现优异。

2. 30%-70%GC含量基因反转录效率出色

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图.以293T细胞总RNA为模板,使用Yeasen、进口品牌进行反转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,Yeasen产品的反转录效率优于进口品牌产品。

3. 检出率高,最高可达1pg 

 

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图.以1 pg-1μg(7个梯度)的293T细胞总RNA为模板,使用Yeasen、A*品牌、B*品牌产品进行反转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,Yeasen产品的1 pg-1 ug检出率优于其他品牌产品。

4.产品稳定性好,4 ℃存放14天依旧稳定

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图.以293T细胞总RNA为模板,分别使用4°C存放14 d 与-20°C存放的试剂盒进行反转录,对得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,Yeasen试剂盒4°C存放14天仍具有很好的稳定性。注:△CT=CT(4°C存放14 d)-CT(-20°C存放),△CT于±0.5以内,认为两者差异可忽略不计。

5.cDNA产物稳定性好

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图.以293T细胞总RNA为模板,使用Yeasen Cat#11142进行反转录,将得到的cDNA 于37℃放置3 d、7 d、14 d,冻融10次、30 次、50次进行测试,以-20℃存放cDNA 作为对照。不同处理后的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,cDNA 在各种条件下定量得到的△CT 均在0.1 范围内,产物具有卓越的稳定性。注:△CT=CT(不同条件下处理cDNA)-CT(-20°C存放cDNA),△CT于±0.5以内,认为两者差异可忽略不计。

6.物种适用范围广

 

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图.以拟南芥、小鼠、大肠杆菌1 μg/10 ng总RNA为模板,使用Yeasen、A*品牌、B*品牌产品进行反转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同模板中Yeasen产品扩增△CT值小于等于其他品牌产品,具有高效的反转录效率。

客户使用反馈

北京大学深圳研究生院

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● RNA样本:来源于THP-1细胞,RNA浓度为100 ng/μL

● 客户评价:一步法非常好用

南京农业大学

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● RNA样本:来源于大豆总RNA,RNA浓度为300 ng/μL

● 客户评价:此产品已将实验步骤和时间缩短到了极致,大大提高了实验效率

 

订购信息

产品名称

产品货号

规格

Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR

11142ES10

10 T

11142ES60

100 T

 

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反转录酶

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