产品规格:100 U
产品价格:¥ 455.00
类别:PCR相关

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产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL
10303ES60
100 U
455.00
10303ES76
500 U
1955.00
10303ES96
10000 U
31255.00
产品描述
热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。
产品组分
编号
组分名称
产品编号/规格
10303ES60
(100 U)
10303ES76
(500 U)
10303ES96
(10000 U)
10303
Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL
100 μL
500 μL
10× 1 mL
产品应用
1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。
2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。
酶活定义
以25℃,30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。
失活方式
50℃,10 min。
运输储存方法
干冰运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
1. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性;
2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;
3. 本产品仅做科研用途;
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
应用实例
1. 按下列体系配制PCR反应液:
组分
体积(μL)
终浓度
10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)
5
1×
25 mM MgCl2
3
1.5 mM
dUTP (10 mM)
3
0.6 mM
dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)
1
0.2 mM each
模板DNA
Optional
-
引物1 (10 μM)
2
0.4 μM
引物2 (10 μM)
2
0.4 μM
Taq DNA Polymerase (5 U/μL)
0.5
0.05 U/μL
Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL
1
1 U/50 μL
ddH2O
Up to 50
【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。
2. PCR反应:
反应温度
反应时间
循环数
目的
25℃
10 min
1
降解含U模板
94℃
2 min
1
UDG酶失活,模板预变性
95℃
10 sec
30-35
变性
60℃
20 sec
退火
72℃
30 sec/kb
延伸
72℃
5 min
1
终延伸
【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。
HB220615