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400-6111-883
Hieff® Quick exosome isolation kit(for Body Fluids) 体液外泌体快速抽提试剂盒
产品货号:41204ES10
产品规格:10 T
产品价格:¥ 1585
类别:外泌体分离与鉴定

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  • 产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    目录价(元)

    Hieff® Quick exosome isolation kitfor Body Fluids)

    体液外泌体快速抽提试剂盒

    41204ES10

    10 T

    1585

    41204ES30

    30 T

    3555



    产品描述
     

     

    Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

    本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从体液如脑脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等体液中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。

     

    产品组分

     

    编号

    组分

    产品编号/规格

    41204ES10

    41204ES30

    41204-A

    Exosome isolation solution(Body Fluids)

    10 T (5 mL)

    30 T (15 mL)

     

    运输和保存方法

     

    室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。

     

    注意事项

     

    1、使用前请将外泌体抽提试剂41204-A)充分混匀。

    2、产品只针对体液样本,不适用其它血清/血液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

    3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

    4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    5、本产品仅作科研用途!

     

    操作方法

     

    样品预处理:

    1、收集新鲜的样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻,待完全融化后置于冰上待用。

    2、1 mL(单次样品量不能低于1 mL)体液样品转移至离心管中,4℃,3000 × g离心10 min,弃沉淀,并将上清转移至新的离心管中。

    3、将转移的上清,4 ℃,10,000 × g离心20 min,弃沉淀,将上清液转移至新的离心管中。

    外泌体分离:

    1、向预处理后的样品中,按照下表加入Exosome isolation solution (其他样品量根据表中试剂用量进行等比例变换)

    Body Fluids

    41204-A 试剂用量

    2.0 mL

    0.5 mL

    4.0 mL

    1.0 mL

    2、盖紧离心管盖,涡旋振荡1 min,放置于4℃冰箱静置2 h。

    3、取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60 min,弃上清(尽可能吸净上清液),收集富含外泌体的沉淀。

    4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物,待其充分悬浮于PBS后,将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

    【注】加入PBS的量,建议根据初始样本的体积决定,初始样本体积1×PBS体积=10:1。

    5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃,12,000×g离心2 min,弃沉淀,保留上清液,该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。

    【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀,建议重复步骤5,多次离心至无明显沉淀

    6、纯化后的外泌体可于4℃保存3天,-80℃ 长期保存,建议对外泌体进行分装后保存,避免反复冻融。

    外泌体纯化(可选):

    鉴于体液中杂蛋白较多,如果后续需要进行细胞共培养或者高通量测序,建议进一步纯化外泌体。可以使用密理博100kD的孔径的超滤管于4℃以14,000×g离心10-30 min,内管中即为纯化后的外泌体颗粒;除此之外,还可以使用抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

    外泌体除菌(可选):

    获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。

     

    相关产品

     

    应用

    货号

    名称

    规格

    外泌体提取

    41201ES25

    Hieff® Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media)
    细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒

    25 mL

    41202ES30

    Hieff® Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma)
    血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒

    20 mL

    外泌体定量

    20118ES60

    Lysis Buffer for WB/IP Assays
    免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

    100 mL

    20201ES76

    BCA Protein Quantification Kit
    BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

    500 T(100 mL)

    外泌体鉴定

    (Western Blot)

    41203ES05

    Exosome identification kit for Western Blot
    外泌体鉴定试剂盒

    5 T

    36232ES10

    Precast Protein Improve Gels,,8%,10 wells
    8% 高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

    36233ES10

    Precast Protein Improve Gels,,10%,10 wells
    10%高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

    36234ES10

    Precast Protein Improve Gels,,12%,10 wells
    12%高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

    36235ES10

    Precast Protein Improve Gels,,15%,10 wells
    15%高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

    20352ES76

    GoldBand 3-color High Range Protein Marker(10-245kDa)
    三色预染蛋白质分子量标准

    2×250 μL

    外泌体标记

    40726ES10

    DiI (DiIC18(3))
    细胞膜橙红色荧光探针

    10 mg

    40757ES25

    DiR Iodide (DiIC18(7))
    细胞膜深红色荧光探针

    25 mg

     

    HB210915