产品规格：10 T
产品价格：¥ 355
类别：逆转录预混液（for qPCR）
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产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR
11142ES10
10 T
355
11142ES60
100 T
1455
产品描述
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR是Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)的升级版，可在同一管中进行逆转录和基因组去除两个反应，操作简便，可有效降低复杂加样过程造成的样品污染和RNA降解的风险。本产品中5×Hifair® One Step RT SuperMix中含逆转录反应所需的全部试剂（Hifair® V Reverse Transcriptase, RNase Inhibitor, Oligo(dT)18 Primer, Random Primer, dNTPs, Buffer)，反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA，同时去除基因组DNA污染。另外，本产品提供了5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix，用于配置无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。
本产品中的Hifair® V Reverse Transcriptase可耐受高达60°C的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。逆转录产物兼容探针法与染料法qPCR，探针法与染料法qPCR Mix分别推荐翌圣Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184)，进行高性能基因表达分析。
产品组分
组分编号
组分名称
产品规格
11142ES10 (10 T)
11142ES60 (100 T)
11142-A
5×Hifair® One Step RT SuperMix
40 μL
400 μL
11142-B
gDNA Remover Mix
10 μL
100 μL
11142-C
5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix
20 μL
40 μL
11142-D
RNase free H2O
1 mL
2×1 mL
产品应用
适用于RT-qPCR实验。
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C保存，有效期12个月。
注意事项
1）所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免RNase污染。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！第一链cDNA合成操作步骤
1. 反应体系配置：在冰上融化11142-A/B/C组分，将试剂各组分充分震荡混匀，并在RNase-free离心管中配置如下体系：
组分
使用量
RNase-free H2O
To 20 μL
5×Hifair® One Step RT SuperMix
4 μL
gDNA Remover Mix
1 μL
Total RNA
10 ng-1μg
No-RT Control反应（可选）
5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix，用于配置无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。
组分
使用量
RNase-free H2O
To 20 μL
5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix
4 μL
gDNA Remover Mix
1 μL
Total RNA
10 ng-1μg
2. 轻轻混匀，按照如下程序进行逆转录
温度
时间
30°C
5 min
55°C
15 min
85°C
30 sec*
【注】：1. 逆转录温度：推荐使用55°C。对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到60°C。
2. 逆转录产物可立即用于后续qPCR反应，也可-20°C短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80°C保存，避免反复冻融。
* 灭活时间：推荐常规基因选择30 sec，GC含量较高的基因（例如超过60%），可以选择5 min，使逆转录酶充分灭活。
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货号
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