产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
TrypLE Express 酶 (1X),含酚红 | 40134ES60 | 100 mL | 340.00 |
产品描述
TrypLE是一种动物来源的重组酶,可替代猪或牛胰蛋白酶,用于分离塑料制品上的附着依赖细胞系。TrypLE裂解赖氨酸和精氨酸C端肽键,但由于TrypLE的高纯度,其特异性比天然胰蛋白酶制剂更强。TrypLE已经证明了在无血清和血清补充系统中培养的细胞的分离能力。TrypLE产品溶于DPBS/ 1mM EDTA中,室温稳定,使用方便。
运输和保存方法
室温(15°C to 30°C)保存,避光。有效期24个月。
注意事项
1)单用稀释剂即可使 TrypLE Express 失活,无需使用胰蛋白酶抑制剂(如 FBS)。
2)TrypLE在 2℃至8℃和-20℃至-5℃保存时也很稳定,可避光长达24个月。
操作方法
TrypLE被设计为现有方案中胰蛋白酶的直接替代品。
1. 使用前预热TrypLE和完全生长培养基至37°C。尽量减少停留时间。
【注意】:TrypLE可在室温环境下用于多种类型的细胞。
2. 吸取用过的培养基并丢弃。
3. 用5ml不含钙和镁的磷酸缓冲盐水(DPBS)冲洗单层细胞,吸取和丢弃。
4. 4. 向培养瓶中加入适量的TrypLE酶(如75 cm2培养瓶加入5ml)。用TrypLE酶确保单层细胞被完全覆盖。
5. 在37°C孵育直到细胞分离。用倒置显微镜观察细胞单层,以确保细胞完全脱离培养瓶表面。如有必要,轻敲培养瓶以去除细胞。
6. 向培养瓶中加入5-10毫升预热过的完全培养基。向各个方向倾斜培养瓶以彻底冲洗培养瓶。细胞悬浮液加到15毫升离心管中。
7. 100 g离心5-10分钟。
8. 丢弃上清,用2-5毫升预热过的完全培养基重悬细胞。
HB220927