产品规格:1 mL
产品价格:¥ 1365.00
类别:探针法定量

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产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
11208ES03
1 mL
1365.00
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
11208ES08
5 mL
5565.00
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
11208ES60
20×5 mL
91265.00
产品描述
本产品是2×Mix预混合试剂,能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性,本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编号/规格
11208ES03(1 mL)
11208ES08(5 mL)
11208-A
2×Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
1 mL
1 mL × 5
11208-B
50×Low Rox
40 μL
200 μL
11208-C
50×High Rox
40 μL
200 μL
运输与保存方式
冰袋运输,-20℃储存;有效期18个月。
反应体系
反应组分
体积(μL)
终浓度
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
10
1×
Primer
Mix
x
0.1-1 μM
TaqMan Probe Mix
y
50 nM-300 nM
50×High or Low Rox
0.4
1×
模板DNA/cDNA
1-100 ng
-
ddH2O
up to 20
-
【注】:1)上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量,可根据具体实验情况进行调整,选择最适投入量和浓度;
2)一般情况下,每条引物浓度为0.2 μM即可得到较好的扩增效果,引物浓度可在0.1-1 μM的范围内进行调节;
3)反应体系可根据实验需求进行等比例调节,模板体积不超过总体积的1/10。
扩增程序
循环步骤
温度
时间
循环数
预变性
95℃
5 min
1
变性
95℃
5 s
40
退火/延伸
60℃
30 s
【注】:
1)某些情况下,可通过调节退火延伸时间提高多重qPCR反应的性能。2)反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性。
注意事项
一、关于操作
1)请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀,短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
2)为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3)使用过程中避免产品的反复冻融。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!二、实验方法
a:引物设计
1. 引物必须具有特异性。
2. 引物的Tm值必须在58-60℃,而且各组引物的Tm差异应控制在1-2℃。
3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
b:探针设计
1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10℃(68-70℃)。
2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
实验案例
检测HEK293T细胞A1、A2、A3、A4基因10倍梯度浓度扩增。
一、反应体系配制反应组分
体积(μL)
终浓度
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
10
1×
Primer Mix
0.5
250 nM
TaqMan Probe Mix
0.5
250 nM
50×High or Low Rox
0.4
1×
HEK293T细胞基因组
0.2 ng~200 ng
-
ddH2O
up to 20
-
二、扩增程序同说明书推荐
三、实验结果图1:本产品能够有效进行多重定量PCR反应。参检基因的扩增效率在95%-105%之间。
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货号
规格
价格(元)
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